Batay sa Fort Worth ng US Navy, naganap ang mga pagsubok sa unang produksyon na F-35A Lightning II fighter, ang kumpanyang Amerikano na si Lockheed Martin. Ang sasakyang panghimpapawid na may numero ng buntot na AF-6 ay gumawa ng isang pagsubok na flight na tumatagal ng isang oras. Ang mga pagsusuri ay natagpuang ganap na matagumpay, ayon sa Star-Telegram.
Maraming iba pang mga flight flight ang pinlano para sa malapit na hinaharap sa parehong base, pagkatapos na ang F-35A ay pupunta sa isa pang base - Edwards sa huling bahagi ng Marso - unang bahagi ng Abril, kung saan maraming mga pagsubok ang magaganap. Inaasahan din sa 2011 ang paghahatid ng unang produksyon ng short-take-off at patayong landing fighter, ang F-35B, sa US Marine Corps. Sa 2012, tatanggap ng US Navy ang unang production carrier-based F-35C.
Nakatanggap ng mga sasakyan sa produksyon, magsasagawa ang militar ng Amerika ng kanilang mga pagsubok para sa paggamit ng labanan. Batay sa mga resulta ng mga pagsubok, matutukoy ng militar ang mga kinakailangan para sa pagpino ng mga bagong mandirigma. Ayon sa iskedyul ng US DoD, ang F-35A at F-35C ay papasok sa serbisyo sa kalagitnaan ng 2016, at ang F-35B sa 2018.
Magsisimula ang pagsasanay sa flight ng F-35 bago pa mailagay ang serbisyo sa bagong sasakyang panghimpapawid. Ang mga piloto ng labanan ng US Air Force ay magsisimulang magsanay sa mga F-35A fighters sa pagtatapos ng 2011. Para sa hangaring ito, ang Eglin Air Force Base ay makakatanggap ng 20 sasakyang panghimpapawid na may software ng pagsasanay sa Block 1. Kasunod ng isang maikling pagsasanay sa magtuturo, magsisimula ang pagsasanay para sa maginoo na mga piloto.
